流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司有推薦嗎？

流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)，對于新手來說，因?yàn)榻?jīng)驗(yàn)和技術(shù)有限，要做好還是很難的，這時(shí)候可以找個(gè)靠譜的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司協(xié)助！那問題來了，長沙細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司哪家好呢？有推薦嗎？

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流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期，一般是采用經(jīng)典的碘化丙啶（PI）染色的方法進(jìn)行周期分析， PI可以和雙鏈DNA結(jié)合產(chǎn)生熒光，熒光強(qiáng)度和DNA含量呈正比，因此，我們可以根據(jù)DNA含量的多少來進(jìn)行細(xì)胞周期的分析檢測。

流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)步驟：

1．用6孔板培養(yǎng)細(xì)胞，待細(xì)胞生長達(dá)到60%-70%，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求處理，繼續(xù)培養(yǎng)；

2．根據(jù)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞處理后，把細(xì)胞吸出至1.5ml離心管內(nèi)，200g 離心5min；

3．用 PBS 洗滌細(xì)胞2次，200g離心5min，收集1-5×105 細(xì)胞；

4．細(xì)胞固定：加入1ml冰浴預(yù)冷70%乙醇中，長沙細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物提醒，一定要輕輕的吹打混勻，4℃固定2h或更長時(shí)間，（一般的話，長沙細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物建議固定12-24 h可能效果更佳）。200g左右離心3-5min，沉淀細(xì)胞。加入約1ml冰浴預(yù)冷的PBS，重懸細(xì)胞。再次離心沉淀細(xì)胞，小心吸除上清，（長沙細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物建議，可以殘留約50μl左右的PBS，以避免吸走細(xì)胞）。輕輕彈擊離心管底，（長沙細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物提醒，這樣做是為了分散細(xì)胞，避免細(xì)胞成團(tuán)）。當(dāng)然了，還需要注意的是，70%乙醇在使用前一定要記得進(jìn)行預(yù)冷處理；

5．配制碘化丙啶染色液；

6．染色：每管細(xì)胞樣品中加入0.5 ml碘化丙啶染色液，緩慢并充分重懸細(xì)胞沉淀，37℃溫浴30min，（長沙細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物提醒，記得避光）。隨后可以4℃或冰浴避光存放。染色完成后宜在24h內(nèi)完成流式檢測；

7．流式檢測：用流式細(xì)胞儀在激發(fā)波長488nm波長處檢測紅色熒光，同時(shí)檢測光散射情況。

好了，關(guān)于流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期的實(shí)驗(yàn)今天就說到這了，如果你對流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)還有疑問的，可以直接咨詢長沙細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物客服，24小時(shí)在線免費(fèi)咨詢。