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(流式細(xì)胞儀)細(xì)胞凋亡檢測(cè)實(shí)驗(yàn)方法介紹!細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司有推薦嗎?

目前,絕大部分實(shí)驗(yàn)室用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞凋亡檢測(cè)的方法有這3種,PI單染色法、Heochst 33342/PI雙染色法和Annexin V/PI雙染色法。


這3種方法都非?简(yàn)操作人員的技術(shù),也需要有專業(yè)儀器進(jìn)行檢測(cè)(細(xì)胞流式儀比較貴,很多實(shí)驗(yàn)室并沒有),所以,對(duì)于那些沒有儀器或經(jīng)驗(yàn)的科研小白來說,尋找一家可靠且專業(yè)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司很重要,那問題來了,湖南長(zhǎng)沙有合適的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司推薦嗎?


長(zhǎng)沙慧登生物實(shí)驗(yàn)室我們比較推薦,因?yàn)樗麄儞碛薪?jīng)驗(yàn)豐富、技術(shù)嫻熟的專業(yè)團(tuán)隊(duì),而且還具備良好的實(shí)驗(yàn)設(shè)施和專業(yè)的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地,相信能夠給你提供高質(zhì)量的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)。


今天就和長(zhǎng)沙細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室一起來學(xué)習(xí)下,如何用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞凋亡檢測(cè)吧~


(流式細(xì)胞儀)細(xì)胞凋亡檢測(cè)實(shí)驗(yàn)推薦方法一:PI單染色法


1. 收集細(xì)胞500-1000 r/min離心5min,棄去培養(yǎng)液。

2. 3ml PBS洗滌1次。

3. 離心去PBS,加入冰預(yù)冷的70%的乙醇固定,4℃,1-2h。

4. 離心棄去固定液,3ml PBS重懸5min。

5. 400目的篩網(wǎng)過濾1次,500-1000r/min離心5min,棄去PBS。

6. 用1ml PI染液染色,4℃、30min,長(zhǎng)沙細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室提醒,記得避光。

7. 流式細(xì)胞儀檢測(cè)。


(流式細(xì)胞儀)細(xì)胞凋亡檢測(cè)實(shí)驗(yàn)推薦方法二:Heochst 33342/PI雙染色法


1. 懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞在培養(yǎng)的狀態(tài)下加入Heochst 33342,終濃度為1ug/ml;37℃孵育7-10min。

2.低溫500-1000r/min離心5min棄去染液。

3. 加入1.0ml PI染液,4℃,染色15min,長(zhǎng)沙細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室提醒,也要記得避光。

4. 400目的篩網(wǎng)過濾1次。

5. 流式細(xì)胞儀分析。


(流式細(xì)胞儀)細(xì)胞凋亡檢測(cè)實(shí)驗(yàn)推薦方法三:Annexin V/PI雙染色法


1. 細(xì)胞收集:懸浮細(xì)胞直接收集到10ml的離心管中,500-1000r/min離心5min,棄去培養(yǎng)液。

2. 用孵育緩沖液洗滌1次,500-1000r/min離心5min。

3. 用100ul的標(biāo)記溶液重懸細(xì)胞,室溫下孵育10~15min,長(zhǎng)沙細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室再次提醒,記得避光。

4. 500-1000r/min離心5min沉淀細(xì)胞孵育緩沖液洗1次。

5. 加入熒光溶液4℃下孵育20min,避光并不時(shí)振動(dòng)。

6. 流式細(xì)胞儀分析。


好了,(流式細(xì)胞儀)細(xì)胞凋亡檢測(cè)實(shí)驗(yàn)做完!3種實(shí)驗(yàn)方法的結(jié)果又怎么看呢?怎么判斷呢?這也是一門學(xué)問,但這由于篇幅有限,我們今天就不詳細(xì)討論交流了,如果大家對(duì)此想深入學(xué)習(xí)的,可以直接咨詢長(zhǎng)沙細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室客服,24小時(shí)在線免費(fèi)咨詢!



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