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要進行細胞實驗了,但突然發(fā)現(xiàn)細胞污染了,怎么補救?

復蘇的細胞背景臟和出現(xiàn)小黑點,這在各大實驗室都有發(fā)生過,這是很正常的,原因有很多,比如細胞碎片、細胞器折光、凋亡小體、血清中的沉淀物、微生物污染(如細菌、真菌、支原體等)或黑膠蟲污染等等。

如何區(qū)分是細胞碎片還是微生物污染呢?

靠譜的長沙細胞實驗外包公司慧登生物實驗室建議,可以通過以下幾個步驟簡單辨別:

1、看黑點動不動:如果黑點在顯微鏡下很活躍,動來動去,那可能是細菌污染。細胞碎片通常不會移動或只表現(xiàn)出布朗運動。

2、看黑點的形狀:如果是細菌,那培養(yǎng)液中一般會出現(xiàn)大量相同大小的黑點,細胞碎片的話,通常大小不均一。

3、看培養(yǎng)基渾不渾濁:渾濁且發(fā)黃的話大概率就是微生物污染。

4、看細胞狀態(tài):細胞狀態(tài)不佳就可能產(chǎn)生細胞碎片(特別是原代,特別容易產(chǎn)生碎片,所以我們切記要勤換液),此時可以加入清除試劑測試下,如果后面細胞狀態(tài)有顯著改善,這黑點可能就是由微生物污染了。

那細胞污染了怎么辦呢?還能救的回嗎?

一般的話,只要細胞污染,如果不是十分珍貴的細胞,靠譜的長沙細胞實驗外包公司慧登生物實驗室建議是處理后丟棄,重新培養(yǎng),因為要想完全去除細胞中的微生物污染是非常困難的!

但是吧,如果實在舍不得,也是有辦法的,比如黑膠蟲污染,黑膠蟲污染主要源于血清,靠譜的長沙細胞實驗外包公司慧登生物實驗室建議可以更換批次較好的血清、使用無菌的PBS洗細胞、換用一次性塑料培養(yǎng)瓶等等降低被污染的可能性。

黑膠蟲污染處理步驟:

1、用0.25%的胰酶消化,當有少量細胞變圓或脫壁時,用血清終止消化。

2、用培養(yǎng)液或D-Hanks液清洗3遍(緩緩流過細胞表面),不要吹打,吹散細胞。

3、換培養(yǎng)瓶培養(yǎng),隔天換液,2天后重復一次。

4、每24-36h換液一次,一周后,查看黑點是否基本消失。

如果不是污染,我們又怎么處理呢?

對于細胞碎片和凋亡小體,可以通過離心和更換新鮮培養(yǎng)基來清除。

如果是血清中的沉淀物,那靠譜的長沙細胞實驗外包公司慧登生物實驗室建議你不用熱滅活處理血清,因為熱滅活可能會增加沉淀物的形成。

好了,細胞污染的問題解決了,如果大家對其他實驗還有不明白的,或者是需要實驗協(xié)助指導的,可以直接咨詢靠譜的長沙細胞實驗外包公司慧登生物實驗室客服,24小時在線免費咨詢。



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