免疫組化和免疫熒光有什么區(qū)別？實驗時我們怎么選？

其實，免疫組化和免疫熒光都可對蛋白定位進行檢測（確定蛋白表達在細胞核、細胞質(zhì)、還是細胞漿），但要仔細說下區(qū)別的話，長沙醫(yī)學(xué)實驗外包公司慧登生物實驗室覺得，主要有以下幾個方面的區(qū)別：

1、實驗原理上

免疫組化是一項包括免疫組織化學(xué)和免疫細胞化學(xué)的免疫化學(xué)技術(shù)，利用顯色劑標(biāo)記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應(yīng)和組織化學(xué)的呈色反應(yīng)，實現(xiàn)對目標(biāo)抗原定性、定量、定位分析。免疫熒光則是采用熒光素標(biāo)記抗體（抗原）作為探針，檢測目標(biāo)組織/細胞中的目標(biāo)抗原（抗體），形成帶有熒光素的抗原抗體復(fù)合物。長沙醫(yī)學(xué)實驗外包公司慧登生物實驗室提醒大家，這種熒光復(fù)合物在熒光顯微鏡下，受高壓汞燈光源的紫外光照射，熒光素發(fā)出熒光，通過觀察熒光可以辨別目標(biāo)抗原（抗體）的位置。也可借助工具計算熒光抗原的含量實現(xiàn)定量檢測。

2、標(biāo)本制作上

免疫組化使用石蠟切片和冰凍切片均可，但是免疫熒光則通常用冰凍切片，減少雜質(zhì)干擾。

3、實驗步驟上

免疫組化實驗流程相對復(fù)雜，需要雙氧水處理去除內(nèi)源性酶的影響，還需要DAB顯色，使用蘇木素染核。而免疫熒光步驟簡單，不需要使用雙氧水處理，直接封閉孵育一抗，二抗需要使用熒光二抗，通常用DAPI染核。

4、樣本保存上

免疫組化樣本可以室溫長期保存，但免疫熒光樣本需要避光低溫保存，長沙醫(yī)學(xué)實驗外包公司慧登生物實驗室提醒大家，拍照時間要短，時間長熒光淬滅。

5、應(yīng)用范圍上

免疫組化靈敏度較高，可以檢測組織/細胞中的微量抗原，而免疫熒光靈敏度較低，長沙醫(yī)學(xué)實驗外包公司慧登生物實驗室提醒，尤其是當(dāng)抗原含量較低時，熒光強度弱，不易觀察。

好了，關(guān)于免疫組化和免疫熒光區(qū)別的問題說這些了，當(dāng)然，如果大家還有不明白的或者是需要實驗協(xié)助指導(dǎo)的，也可以直接咨詢長沙醫(yī)學(xué)實驗外包公司慧登生物實驗室客服老師哦！