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神經(jīng)髓鞘LFB染色怎么操作,有什么要注意的嗎?

眾所周知,LFB是一種銅-酞篝染料,具有與髓鞘磷脂結(jié)合的染色特性。通過應用LFB髓鞘染色,可以很好地顯示神經(jīng)組織中的髓鞘結(jié)構(gòu)。包括髓鞘的厚度、連續(xù)性和分布情況。那具體神經(jīng)髓鞘LFB染色怎么操作呢?實驗中又有什么要注意的呢?今天就和長沙實驗外包公司慧登生物實驗室一起學習下吧~


實驗步驟:


1、石蠟切片脫蠟至水:將切片依次放入二甲苯中浸泡20分鐘,然后再放入第二個二甲苯中浸泡20分鐘。接下來,將切片放入無水乙醇中浸泡10分鐘,然后放入第二個無水乙醇中浸泡10分鐘。繼續(xù)將切片依次放入95%、90%、80%和70%酒精中,每個濃度的酒精浸泡5分鐘。最后,用蒸餾水進行洗滌。


2、染色:將切片放入0.1% LFB染液中,在60°C下孵育過夜。隨后,用自來水沖洗。


3、分化:將切片放入70%乙醇中(無固定時間)。然后,將切片浸入0.05%碳酸鋰中,在顯微鏡下控制分色時間,直到滿意的分色效果(可見灰質(zhì)部分顏色變淡)。長沙實驗外包公司慧登生物實驗室提醒,如果分化效果不好,可以交替進行這兩個步驟幾次,直到滿意為止。最后,用水進行洗滌。


4、伊紅復染:將切片放入0.1%伊紅復染液中,浸泡1分鐘,然后用水洗滌。


5、封片:使用電吹風或烘箱將切片吹干。然后,用二甲苯逐漸透明化數(shù)分鐘,最后使用中性樹膠封片。


注意事項:


1、長沙實驗外包公司慧登生物實驗室提醒,在使用0.05%碳酸鋰水溶液進行分色時,應該在顯微鏡下觀察,直到背景呈灰色為止。而在使用70%酒精進行再次分色時,應該分到背景無色為止。


2、在LFB染色完成后,長沙實驗外包公司慧登生物實驗室提醒,可以使用焦油紫溶液或蘇木素-伊紅復染,這樣可以更好地顯示細胞的形態(tài)。在進行復染之后,可以使用正丁醇進行漂洗脫水,這樣可以獲得更好的染色效果。


好了,關(guān)于神經(jīng)髓鞘LFB染色的相關(guān)問題就說這些了,如果大家還有不明白的或者是需要實驗協(xié)助指導的,也可以直接咨詢長沙實驗外包公司慧登生物實驗室客服老師哦!



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