動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：大小鼠帕金森疾病模型如何構(gòu)建？

大小鼠帕金森疾病模型到底該怎么構(gòu)建呢？目前常用的神經(jīng)毒素誘導(dǎo)來(lái)構(gòu)建模型，其原理是神經(jīng)毒素通過(guò)選擇性損傷多巴胺能神經(jīng)元，模擬帕金森病的核心病理過(guò)程。

下面就讓長(zhǎng)沙動(dòng)物模型構(gòu)建外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō)說(shuō)具體實(shí)驗(yàn)方法吧！

1、MPTP誘導(dǎo)小鼠PD模型

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：C57BL/6小鼠（對(duì)MPTP最敏感，8-12周齡，25-30g）。

造模步驟：

① 適應(yīng)性飼養(yǎng)：長(zhǎng)沙動(dòng)物模型構(gòu)建外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室提醒，小鼠提前7天適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境，減少應(yīng)激。

② MPTP溶液配制：將MPTP溶于0.9%生理鹽水，濃度為3-5mg/ml（根據(jù)注射劑量調(diào)整）。

③ 腹腔注射：按30mg/kg/d劑量，每天1次，連續(xù)注射5天（急性模型）；或25-30mg/kg/d，每3.5天1次，持續(xù)5周（慢性模型）。對(duì)照組注射等體積生理鹽水。

病理特征：黑質(zhì)區(qū)多巴胺能神經(jīng)元數(shù)量顯著減少（尼氏染色、TH免疫組化驗(yàn)證）；紋狀體多巴胺（DA）及其代謝產(chǎn)物（DOPAC、HVA）含量降低；無(wú)路易小體形成（與人類(lèi)PD的差異）。

行為學(xué)評(píng)估：運(yùn)動(dòng)功能障礙：轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)（旋轉(zhuǎn)桿停留時(shí)間縮短）、爬桿實(shí)驗(yàn)（爬桿時(shí)間延長(zhǎng)）、步態(tài)分析（步長(zhǎng)減小、步態(tài)周期紊亂）；非運(yùn)動(dòng)癥狀：焦慮（明暗箱實(shí)驗(yàn)）、認(rèn)知障礙（Morris水迷宮）。

2、6-OHDA誘導(dǎo)大鼠PD模型

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：SD大鼠（180-220g，雄性）。

造模步驟：

① 適應(yīng)性飼養(yǎng)：長(zhǎng)沙動(dòng)物模型構(gòu)建外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室也是要提醒大家，讓大鼠提前1周適應(yīng)環(huán)境。

② 立體定向注射：用33G Hamilton注射器，將6-OHDA溶液（濃度2-3μg/μl）注入黑質(zhì)致密部（SNc）或紋狀體。注射位點(diǎn)：SNc（AP-2.90mm, ML 1.10mm, DV-4.50mm）；紋狀體（AP 0.2mm, ML 2.00mm, DV-2.60mm）。注射速度0.2μl/min，注射后留針5分鐘。

③ 對(duì)照組：注射等體積人工腦脊液。成功率：約70%-88.6%（長(zhǎng)沙動(dòng)物模型構(gòu)建外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室提醒，改良紋狀體內(nèi)兩點(diǎn)注射法成功率更高）。

病理特征：注射側(cè)黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元數(shù)量減少（TH免疫組化）；紋狀體DA含量降低；無(wú)路易小體形成。

行為學(xué)評(píng)估：運(yùn)動(dòng)功能障礙：轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)（旋轉(zhuǎn)桿停留時(shí)間縮短）、爬桿實(shí)驗(yàn)（爬桿時(shí)間延長(zhǎng)）、不對(duì)稱(chēng)旋轉(zhuǎn)測(cè)試（阿撲嗎啡誘導(dǎo)，旋轉(zhuǎn)速度>7rpm為成功模型）；非運(yùn)動(dòng)癥狀：機(jī)械痛閾降低（von Frey測(cè)痛儀）。

好了，關(guān)于大小鼠帕金森疾病模型構(gòu)建方法就說(shuō)這些了，如果大家還有不明白的或者是需要實(shí)驗(yàn)協(xié)助指導(dǎo)的，可以直接咨詢(xún)長(zhǎng)沙動(dòng)物模型構(gòu)建外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室客服老師哦！