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裸鼠皮下荷瘤實(shí)驗(yàn)接種結(jié)束,為什么我看不到瘤子?裸鼠皮下荷瘤實(shí)驗(yàn)相信絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都有做過,但大家的成功率有多少呢,相信很多新手開始時(shí)有很多問題發(fā)生,今天長沙動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室就詳細(xì)給大家講解分析下~ 裸鼠皮下荷瘤實(shí)驗(yàn)接種操作: 1、胰酶消化細(xì)胞,計(jì)數(shù)后將其重懸于生理鹽水中。注射前吹打混勻,保證細(xì)胞分散無團(tuán)塊; 2、選擇進(jìn)針部位(一般選擇腋下或腹股溝等血管豐富的部位),用酒精棉球擦拭進(jìn)針部位; 3、向前方穿行,注射前針頭左右動(dòng)一下,若無阻力則證明在皮下,否則可能在皮內(nèi)或肌肉里面; 4、長沙動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室提醒,注射前一定要排空空氣!之后緩慢推注,一般體積為100-150μL,注射完后緩慢拔出針頭,可在注射部位看到明顯的鼓包; 5、接種點(diǎn)離進(jìn)針點(diǎn)盡量遠(yuǎn)一些,防止漏液和污染。 常見問題及處理辦法: 問題1:裸鼠注射完為什么看不到瘤子? 原因:一般接種7-10天后便可看到腫塊長起,未成瘤可能是:細(xì)胞活力差、該腫瘤細(xì)胞不易成瘤、有可能小鼠周齡過大或者是小鼠免疫排斥等原因。 長沙動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室建議的解決方法:加入Matrigel;增加注射的細(xì)胞數(shù)量;更換易成瘤的細(xì)胞系;更換4-6周小鼠;更換重度免疫缺陷的小鼠。 問題2:腫瘤先長后消是怎么回事? 原因:接種時(shí)的組織損傷會(huì)引發(fā)局部炎癥,裸鼠自身會(huì)清除部分壞死細(xì)胞和炎癥組織,導(dǎo)致腫瘤暫時(shí)性縮小。 長沙動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室建議的解決方法:繼續(xù)觀察2-3周,多數(shù)情況下腫瘤會(huì)重新增大;若3周后仍無明顯增長,說明存活的腫瘤細(xì)胞過少,建議更換裸鼠重新接種。 問題3:腫瘤體積差異過大? 原因:長沙動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室建議的提醒,部分腫瘤細(xì)胞(如黑色素瘤 B16)本身生長形態(tài)不規(guī)則,體積存在輕微差異(誤差≤20%)屬正,F(xiàn)象,無需干預(yù)。但是若同組裸鼠腫瘤體積差異>30%則是異,F(xiàn)象了。 好了,關(guān)于裸鼠皮下荷瘤實(shí)驗(yàn)接種操作的問題就說這些了,如果大家還有不明白的或者是需要實(shí)驗(yàn)協(xié)助指導(dǎo)的,可以直接咨詢長沙動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室客服老師哦! |
